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动物医学专业毕业实习报告总结

2024-01-08 22:11:25

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第一篇:生物工程专业的实习报告

一、实习时间:20xx.6.7-6.12

二、实习地点:食品发酵实验室(化学楼119、123)、食品学院实习基地

三、实习目的:

1、学习自制酸奶的方法,熟悉从酸奶中分离和纯化乳酸菌的一般方法。

2、掌握各类酸奶生产的基本工艺和要求。

3、学习奶酒的发酵过程、工艺流程,及其注意事项。

4、对自己所学的科学知识进一步深化,提高实践能力,整体策划部署能力,动手能力,组织能力,团体协作能力,创新能力等方面也有一些提高。

四、实习内容:

1.酵母菌筛选方案的确定

为了获得最佳酵母菌发酵结果,我们通过对Internet资源以及图书资料的搜索和查寻,查的产酯酵母广泛应用于白酒、黄酒、普通酒、醋、酱油中,另外,还应用于果汁中。

所以我们准备了三种菌种来源材料:果皮、酒曲、保藏的酵母斜面。第一种方法是利用果皮做来源,将削下的果皮放入带玻璃珠的三角瓶充分振摇,梯度稀释,涂布于YPD琼脂培养基上。第二种方法是用各种酒曲做为菌种来源,将酒曲粉碎,称量,梯度稀释,而后涂布于YPD琼脂培养基上。第三种方法是利用保藏的酵母斜面作为菌种来源,用接种环在酵母斜面上取一环菌,而后用划线法接种于YPD琼脂平板上,带用于实验。

经过大家的讨论后,一致决定利用酵母斜面上的菌种,对其进行培养。因为利用酵母斜面上的菌种在此次实习中可以用到我们实验上所学习的知识,真正将知识用于实践,并在实践中得到巩固。但是,酵母斜面上的酵母菌制得的菌悬液浓度很大,所以在菌种筛选方面,我们将菌悬液10进制稀释到10-5,10-6,10-7的数量级,各浓度涂布两个平板,另六个平板用于划线分离法进行菌种分离,30度培养24到48h,观察平板上的菌落生长情况。初选出酵母菌,将菌落照片后就进行显微镜观察,筛选到典型的酵母菌株,进行生化实验。将平板上的酵母单菌落接种保藏于斜面培养基(PDA),30度培养48h后,4度冷藏。将PDA斜面培养基上保存的酵母菌接种于培养液中培养,而后接种于豆芽汁发酵液中,进行发酵测产脂能力。

2.酵母菌的筛选及鉴定

11月25日我们按照讨论决定的方案进行了酵母菌的筛选实验,实验内容如下:

2.1 培养基的制备、分装、灭菌(分述在下文中)

在实习中共需要准备六种培养基:YPD培养基、PDA培养基、豆芽汁培养基、葡萄糖产酸产气培养基、硝酸盐生化实验培养基、糖发酵实验培养基。各培养基配方如下:

1、YPD培养基:1%酵母膏,2%蛋白胨,2%葡萄糖,2%琼脂。

2、PDA培养基:2%马铃薯,2%葡萄糖,22%琼脂。

秤取切成小块的马铃薯,加水煮烂(20-30min),八层纱布过滤,滤液中加入葡萄糖,最后加入琼脂。

3、豆芽汁培养基:10%黄豆芽,2%葡萄糖,2%琼脂

洗净豆芽,加水煮沸30min.用纱布过滤。滤液加入琼脂,加热溶解后放入糖,搅拌使它溶解,补水至设定值。

4、糖产酸产气培养基:营养物(0.5%牛肉膏,1%蛋白胨,0.3%氯化

钠,0.2%磷酸氢钠,0.2%溴麝香草酚蓝)配方为20g/1000ml,蒸馏水配制,pH7.4。分装后加葡萄糖0.5%。

5、硝酸盐生化实验培养基:0.3%牛肉浸膏,0.5%-1%蛋白胨,pH7.0(100ml 培养基加入1g硝酸钾)

6、糖发酵实验培养基:营养物(0.5%牛肉膏,1%蛋白胨,0.3%氯化钠, 0.2%磷酸氢钠,0.2%溴麝香草酚蓝)配方为20g/1000ml,蒸馏水配制,pH7.4。分装后加乳糖0.5%。

制备:由于第6种培养基同第4种培养基,则一组配制即可,再加上无菌水,共需制备六种,则将全班分成六个组,我们为第4组,故配制过程如下:

(1)天平调平。

(2)准确秤取7.8g营养物(配390ml),葡萄糖、蔗糖、乳糖各0.65g。

(3)将营养物放入搪瓷缸中,加入390ml蒸馏水,玻璃棒搅拌将其溶解。

(4)pH试纸测其pH是否为7.4,若不是,用氢氧化钠溶液调到7.4。分装:

(1)取三个250ml锥形瓶,每个锥形瓶中倒入130ml的上述溶液。

(2)将上述称好的葡萄糖、蔗糖、乳糖分别倒入三个锥形瓶中,摇晃锥形瓶使其溶解。

(3)将加入糖的营养液分别装入12个试管中,每个试管用移液管放入10ml。

(4)将每两个葡萄糖、蔗糖、乳糖用牛皮纸扎成一捆,即每6个试管扎成一捆,写上班级、组别后待灭菌。

灭菌:将已经包扎好的试管放入灭菌箱中,进行灭菌待用。

以上就是我们组的制备过程,在这个过程中应该注意以下几点:

1、称量前天平要调平。

2、秤取营养物时应准确秤取。

3、溶解后注意调pH值到7.4

4、量取培养液时要准确,特别是向试管中分装时要用移液管。

2.2 酵母菌的分离(详述分离方法,培养条件及观察到的菌落结果)

步骤过程:

1、倒平板:待YPD培养基冷却至50度左右后,按无菌操作法倒12只平板(每皿约倒15ml),平置,待凝。

2、酵母菌稀释:取1mL菌悬液放入装有99ml的无菌水锥形瓶中,摇匀后再从锥形瓶中取1mL放入1号管,依次进行,则管里酵母的浓度依次是10-2~10-7。

3、平板分离:依次从10-7,10-6,10-5的管里取稀释液进行涂布平板,YPD平板每个浓度涂两个。

4、划线法分离:用接种环从酵母斜面上取一环酵母,在酒精灯前按无菌操作法进行划线,将酵母接种于6个平板中。

5、恒温培养:将12个培养皿平板置于30℃恒温箱中培养24~48小时。 结果:

观察菌落:出现了4种不同形态的菌落。

①圆形,菌落大,表面光滑,湿润,突起,乳白色。

②圆形,菌落略小,湿润,突起,质地均匀,呈乳白色。

③椭圆形,菌落略小,湿润,突起,颜色均一,呈乳白色。

④椭圆形,菌落大,湿润,突起,颜色均一,呈乳白色。

结果分析:

通过网上查阅资料显示,正常条件下大多数酵母菌的菌落特征与细菌相似,但比细菌菌落大而厚,菌落表面光滑、湿润、粘稠,容易挑起,菌落质地均匀,正反面和边缘、中央部位的颜色都很均一,菌落多为乳白色,少数为红色,个别为黑色。 啤酒酵母的菌落红酵母的菌落各种酵母菌的菌落。

将我们观察的结果与资料相比,确实符合大多数酵母菌的菌落形态。 结论:观察到的是酵母菌落。

2.3酵母菌的初步鉴定(包括革兰氏染色和糖代谢实验)

2.3.1将平板上分离到的各菌株进行简单染色后进行镜检

观察结果为:

球菌,各个细胞的形状比较规整。

结论:

通过菌体个体形态和菌落形态,初步确定出了一株酵母菌。

注意事项:

1、搬动显微镜时应一手握住镜臂,另一手托住底座,镜身保持直立,并紧靠身体,步态稳健。切记单手拎提,以免目镜头从镜筒上掉出而砸坏。

2、各个镜面切忌用手涂抹,以免手上的油、汗污染镜面,造成发霉、腐蚀。

2.3.2 将初步确定的菌株进行生化实验

步骤过程:

用接种环从平板上挑取已分离的同一菌落接种于糖发酵管和硝酸盐生化管中,接种完后30℃培养。24小时后观察结果。

与此同时,将平板上的酵母单菌落接种保藏于斜面培养基(PDA),30度培养48小时后,4度冷藏,待检其他特性。

结果:

验中并没有观察到,但硝酸盐管中变黄,则分析结果,可能是酵母菌生长不旺盛,导致即使产气也看不出来。

根据这一现象,能够说明该菌株具有产酸产气性能,确定此菌株确实是酵母菌。

3、发酵产酯实验(11.23-11.24)

步骤过程:

(1)准确吸取25ml发酵液于250ml锥形瓶中,加入25ml蒸馏水,滴2滴酚酞指示剂,用0.1mol/L的氢氧化钠滴至微红色,记下消耗氢氧化钠溶液的体积。

(2)将滴定后的发酵液转移至250ml锥形瓶中,准确加入15ml上述氢氧化钠标液,接上冷凝管,加热至沸回流30min。

(3)取下冷却至室温,完全转移至250ml碘量瓶中立即用0.1mol/L的盐酸溶液滴定至微红色刚好消失,纪录盐酸溶液的用量,记录总酯的含量。 结果:

氢氧化钠消耗体积:V1=1.9ml

盐酸消耗体积:V2>15ml

分析与结论:氢氧化钠消耗体积1.9ml用来预估总酯含量,且其越大则总酯越少。由此可见,产酯量应该不少。

按公式:总酯=(15-V2) X0.1X10-3mol 但是我们滴到18ml仍不见结果,并且没有要到微红的迹象。可能是由于配制实验试剂时出现问题,导致没有测出总酯量。

五、总结

短短一周的微生物实习在紧张又有效率的节奏下顺利的结束了。这是我们自己在老师协助下并亲自动手连续完成的一些列实验,在其中感受到了很多平时和课上很少遇到的东西,有自主,有探索,有反思,有合作短暂的实习转眼而过,回顾实习生活,我在实习的过程中,既有收获的喜悦,也有一些遗憾。喜悦是我们都在老师的指导下自主设计了方案并分工鲜明,合理掌握每一步实验用时及时、准确测量数据,最终都得到了相应的结果。而遗憾那就是对实验有些方面的认识仅仅停留在表面,只是在看人做,听人讲如何做,未能够亲身感受、具体处理一些工作,所以未能领会其精髓。但时通过实习,加深了我对实验和微生物基本知识的理解,丰富了我的微生物实验的知识,使我对实验有了深层次的感性和理性认识。认识到要做好实验,既要注重理论知识的学习,更重要的是要把实践与理论两者紧密相结合。更进一步体会到了“实践是最好的老师”的深刻意义。

第二篇:生物专业学生实习报告

一、实习目的

毕业实习是大学生大学学习阶段的重要实践环节,它是与今后的职业生活最直接联系的,我们学生在生产实习过程中将完成学习到就业的过渡,因此实习活动是培养技能型人才,实现培养目标的主要途径。它不仅是校内教学的延续,而且是校内教学的总结。可以说,没有生产实习,就没有完整的教育。作为新世纪的大学生,在注重理论知识学习的前提下,首先要提高生产实习管理的质量。生产实习教育教学的成功与否,关系到学校的兴衰及我们的就业前途,也间接地影响到现代化建设。

二、公司概况

这个学期,我们实验室的全体同学在专业老师的带领下,去到了天津市佳宜酶制剂新技术有限公司和位于东丽开发区的“春发”两个公司进行了实习。佳宜酶制剂新技术有限公司拥有国内权威的生物发酵技术专家和高级专业人员,技术力量强、组织结构精、运行效率高。春发公司更是行业中的佼佼者。通过在这两家公司的实习,让我学到了很多书本上学不到,但又对我今后的发展至关重要的很多有用的知识。比如酶制剂的生产流程,如何对香精产品进行检测等等。我国酶制剂的主要应用领域是食品工业,全世界食品工业用酶约占总量的60%,我国更高达85%以上。酶制剂对我国食品工业的技术进步做出过突出贡献:在啤酒生产中采用淀粉酶的新型辅料液化工艺以及复合酶制剂的应用对提高我国啤酒的产量和质量有重要意义;在玉米深加工领域,采用耐高温淀粉酶和糖化酶的“淀粉喷射液化”技术以及“双酶法”糖化技术全面带动了我国淀粉糖、味精、柠檬酸等生产工艺的改革。近年来,蛋白酶、果胶酶、纤维素酶等在果酒、果汁、调味品、烘焙、肉制品、中药有效成分提取以及多肽保健品生产中的应用也都取得较大的进展。

天津佳宜酶制剂新技术有限公司是以生产酶制剂为主,其产品科技含量高、附加值高。产品主要应用于:白酒酿造、果汁加工、草药提取、生物饲料、烟草、啤酒及纺织等行业,前景广阔。该产品以及添加成本低廉、使用效果显著的优势。

天津春发食品配料有限公司是生产调味香精的专业化大型企业。公司一贯坚持“以人为本”和“技术与质量兴企”,在短短的几年中,迅速发展成为国内调味香精领域的龙头企业。公司采用先进的技术和工艺,成功地实现了香精产品味感上的突破,达到香气与香味的相互协调和补充,使香精产品有了质的飞跃。公司还通过设置驻处办事机构,及时地和顾客沟通,了解需求,形成了集销售和服务于一体的完善的营销体系。目前,“春发”调味香精有200余种产品,畅销全国三十多个省市。“精益求精、永不满足”是春发公司的企业精神,“诚信、求实”是春发公司的经营理念。

三、公司产品及工艺设备

佳宜酶制剂新技术有限公司其主要产品包括果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶等工业、食品工业用酶制剂,广泛应用于白酒、啤酒酿造、果汁加工、草药提取、烟草、饲料及纺织等行业。

纤维素酶是一组由纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、淀粉酶等构成的酶系。可有效地降解各类天然纤维素类物质。通过复配技术后被广泛应用于饲料、织物水洗、草药加工、生麻软化、秸秆处理等领域。食品工业级的产品还可用于果蔬汁加工、烟草加工、酿造、白酒、啤酒、营养保健品等行业。具有添加量少、效率高、作用温和、节能、无污染等优点。而复合型精制果胶酶,以果胶酶为主,还含有多聚半乳糖醛酸酶、纤维素酶、半纤维素酶、酸性淀粉酶、蛋白酶等酶种,可有效地分解果汁中的果胶、纤维素、半纤维素淀粉等为单糖或寡糖,在提高营养价值的同时降低果汁的黏度,提高澄清度,以利于工业化加工。该产品在干燥成型时吸附于膨化的植物蛋白,使终端蛋白产品载体不溶解,有效物易浸出且不存留于被加工产品中,不阻塞过滤膜,活力稳定,溶液助悬性强,解决了国内同类产品的相应弊端。

在这次我在实习过程中还了解了大体的酶制剂的生产流程,大约分以下几个步骤:

1.发酵:首先菌种在本地的实验室中进行扩大培养,之后会将菌种接种到大型的发酵罐中进行逐级放大的分批培养,在发酵过程中,微生物被培植在大型不锈钢罐里,加以必须的空气和养分。这些微生物非常特殊,是有诺维信实验室经多年研发得到的。由于是由人工修饰而得到得菌种,所以其对自然环境得适应能力非常查。为了保证完全的无菌,整个发酵过程由计算机自动控制,以保证最适合微生物生长的条件。在发酵罐中生长一段时间后,会产生大量得菌液,这些液体就会通过管道运往下一个车间即提取车间。

2.提取:提取过程的主要目的是从发酵液中分离和纯化酶,需要经过许多过滤和浓缩步骤,包括真空过滤和先进的膜过滤,以保证高效分离和纯化。此过程已经把菌体都过滤掉了,所需要的有效成分都在液相里。对于液体酶,还要通过标化步骤使酶制剂标准化和稳定化。在提取过程中,严格的GMP控制和良好的设备清洁为生产高质量酶制剂产品提供了有力保障。提取过后会生产出液态酶,如果要生产固态酶,则液体会流向下一个造粒车间。

3.造粒:分离、纯化后的液体酶经过最后一道工序―造粒,便成为可自由流动、无粉尘、使用安全、方便的固体颗粒酶。这一诺维信专有技术支持的工艺过程采用多种先进的造粒技术,如混合器造粒和流化床造粒。固体粒状酶制剂主要是应用在洗涤剂的生产过程中。

春发公司公司是国内最早开发生产方便面汤料用调味香精的专业企业。产品有四种剂型(粉末、油状、水状和膏状)、五大系列(牛肉、猪肉、鸡肉、海鲜及蔬菜),其中牛肉、猪肉、鸡肉系列调味香精的主体风味又可分成红烧、炖煮、炸烤三大类。方便面调味香精是以天然畜禽肉、骨、脂肪为原料,经预处理、酶解技术、美拉德反应及调香后形成的肉质感强、有特征风味的产品。

为适应餐饮业、家用调味品及膨化食品的调味需求,公司还研制生产了猪肉、鸡肉、牛肉三大类热反应肉粉和以相应的热反应物为基础、经调香后的产品。春发公司凭借着与美商合资的良好时机,引进新技术、新原料、新观念,广招贤才,加大投入,采用国际先进技术,开展了超临界萃取和微胶囊等基础技术的开发和应用,加强美拉德反应的深入研究和改进,设计安装了反应香基生产线,引进了大型喷雾干燥设备,建成了粉状香精生产线、油质香精生产线和水质香精生产线。

春发公司给我最深刻的印象是作为香精行业的龙头企业,公司时刻注意着要把好质量关,作好模范带头作用。公司有一个食品安全检测实验室以达到了CNAS标准,这在同类企业中是绝无仅有的,同时也是公司的立足之本。该实验室分为天平室,样品室,调香室,微生物检测室等多个标准要求严格的实验室。同时每一个从这个实验室通过的样品,都会被留下一部分样品,作到生产的每一步都有据可依,有样可查。这就更加保证了产品的安全度。

四、心得体会

通过此次实习,让我学到了很多课堂上更本学不到的东西,仿佛自己一下子成熟了,懂得了做人做事的道理,也懂得了学习的意义,时间的宝贵,人生的真谛。明白人世间一生不可能都是一帆风顺的,只要勇敢去面对人生中的每个驿站!这让我清楚地感到了自己肩上的重任,看清了自己的人生方向,也让我认识到了会计工作应支持仔细认真的工作态度,要有一种平和的心态和不耻下问的.精神,不管遇到什么事都要总代表地去思考,多听别人的建议,不要太过急燥,要对自己所做事去负责,不要轻易的去承诺,承诺了就要努力去兑现。

一:苗圃

苗圃主要负责花卉的培育,植物园的花都是在苗圃先培养到一定程度后,再拿到园内供游客观赏,如秋海棠、千日红、石榴花、一串红等等,都是在苗圃先通过各种方法培养。一般的步骤有:播种、移植、育苗。播种方法基本上都是相通的,无非是土,水,光照,温度的管理,根据种子的大小,还有自己的设施条件选择适合自己的。

(一)播种

花卉播种一般在保护地区进行,至少应遮雨或适当遮光降温等基础设施,才能达到各种品种出芽所需要的条件,保证其出芽率。选择疏松透气的土壤(一般选用细粒的泥炭,草炭或腐叶土).装入花盆或播种盘里。将土壤浇透水(水里配点多菌灵或托布津或百菌清达到土壤消毒的目的,往往配八百倍液),把种子均匀的洒在土层上。细粒种子(如百里香,矮牵牛,瓜叶菊,海棠种子等)播种,不需要盖土,但要注意保持土壤湿度.用细嘴喷壶喷雾状水来保湿.大水流的话易把种子冲走或者冲到土层深处,细小种子不易顶土出芽.大粒种子则要盖土

厚度为种子大小的2-3倍。另外,覆土的多少,还跟种子出芽的好光性与嫌光性有关,如矮牵牛属好光性种子,播后可不覆土.而三色堇等嫌光性种子,播后必须覆土并不得露出种子.如果种子在未发芽之前,因其它原因,露出土面,则还要补土,直到看不到种子.花种播种后,必须保持土壤潮湿,但不要渍水,在出芽之前不得干水,这对于细粒种子尤其重要。大多数种子的发芽适温在20-25度.需要注意的是,有的种子必须在低温条件下才能发芽.如花毛茛,飞燕草.大多数香草和秋冬播的种子,温度不要高于25度.春夏播种子不要低于20度,如果达不到温度,用保鲜膜提高温度,保鲜膜同时还具有保湿作用.夏季的时候,所有的种子都要放在阴凉的地方,要遮阴遮雨.冬季则要注意保暖与防霜冻.种子发芽前还没有长根,需要人为补充水分来维持生命,土壤要保持湿度,但不能渍水。如果盖有保鲜膜,待种子发芽后,要及时去掉,及时将花盆搬到有散射光的地方见光。并且,种子发芽后要及时施一些液肥,比如磷酸二氢钾,肥的浓度在200倍左右,浓度不要太高.等长大些后根据植物的生长状况施肥。

等种子长到2-3片叶时,可以移栽.5-6片叶时及时定植.定植前盆度放一点缓释颗粒肥(比如复合肥)和腐熟的有机肥。如果想植株将来丰满一些,可以打尖或摘心,同时也起到矮化的作用.但鸡冠花不能打尖。

第三篇:生物专业学生实习报告

一、实习时间:20xx.6.7-6.12

二、实习地点:食品发酵实验室(化学楼119、123)、食品学院实习基地

三、实习目的:

1、学习自制酸奶的方法,熟悉从酸奶中分离和纯化乳酸菌的一般方法。

2、掌握各类酸奶生产的基本工艺和要求。

3、学习奶酒的发酵过程、工艺流程,及其注意事项。

4、对自己所学的科学知识进一步深化,提高实践能力,整体策划部署能力,动手能力,组织能力,团体协作能力,创新能力等方面也有一些提高。

四、实习内容:

1.酵母菌筛选方案的确定

为了获得最佳酵母菌发酵结果,我们通过对Internet资源以及图书资料的搜索和查寻,查的产酯酵母广泛应用于白酒、黄酒、普通酒、醋、酱油中,另外,还应用于果汁中。

所以我们准备了三种菌种来源材料:果皮、酒曲、保藏的酵母斜面。第一种方法是利用果皮做来源,将削下的果皮放入带玻璃珠的三角瓶充分振摇,梯度稀释,涂布于YPD琼脂培养基上。第二种方法是用各种酒曲做为菌种来源,将酒曲粉碎,称量,梯度稀释,而后涂布于YPD琼脂培养基上。第三种方法是利用保藏的酵母斜面作为菌种来源,用接种环在酵母斜面上取一环菌,而后用划线法接种于YPD琼脂平板上,带用于实验。

经过大家的讨论后,一致决定利用酵母斜面上的菌种,对其进行培养。因为利用酵母斜面上的菌种在此次实习中可以用到我们实验上所学习的知识,真正将知识用于实践,并在实践中得到巩固。但是,酵母斜面上的酵母菌制得的菌悬液浓度很大,所以在菌种筛选方面,我们将菌悬液10进制稀释到10-5,10-6,10-7的数量级,各浓度涂布两个平板,另六个平板用于划线分离法进行菌种分离,30度培养24到48h,观察平板上的菌落生长情况。初选出酵母菌,将菌落照片后就进行显微镜观察,筛选到典型的酵母菌株,进行生化实验。将平板上的酵母单菌落接种保藏于斜面培养基(PDA),30度培养48h后,4度冷藏。将PDA斜面培养基上保存的酵母菌接种于培养液中培养,而后接种于豆芽汁发酵液中,进行发酵测产脂能力。

2.酵母菌的筛选及鉴定

11月25日我们按照讨论决定的方案进行了酵母菌的筛选实验,实验内容如下:

2.1培养基的制备、分装、灭菌(分述在下文中)

在实习中共需要准备六种培养基:YPD培养基、PDA培养基、豆芽汁培养基、葡萄糖产酸产气培养基、硝酸盐生化实验培养基、糖发酵实验培养基。各培养基配方如下:

1、YPD培养基:1%酵母膏,2%蛋白胨,2%葡萄糖,2%琼脂。

2、PDA培养基:2%马铃薯,2%葡萄糖,22%琼脂。

秤取切成小块的马铃薯,加水煮烂(20-30min),八层纱布过滤,滤液中加入葡萄糖,最后加入琼脂。

3、豆芽汁培养基:10%黄豆芽,2%葡萄糖,2%琼脂

洗净豆芽,加水煮沸30min.用纱布过滤。滤液加入琼脂,加热溶解后放入糖,搅拌使它溶解,补水至设定值。

4、糖产酸产气培养基:营养物(0.5%牛肉膏,1%蛋白胨,0.3%氯化

钠,0.2%磷酸氢钠,0.2%溴麝香草酚蓝)配方为20g/1000ml,蒸馏水配制,pH7.4。分装后加葡萄糖0.5%。

5、硝酸盐生化实验培养基:0.3%牛肉浸膏,0.5%-1%蛋白胨,pH7.0(100ml培养基加入1g硝酸钾)

6、糖发酵实验培养基:营养物(0.5%牛肉膏,1%蛋白胨,0.3%氯化钠,0.2%磷酸氢钠,0.2%溴麝香草酚蓝)配方为20g/1000ml,蒸馏水配制,pH7.4。分装后加乳糖0.5%。

制备:由于第6种培养基同第4种培养基,则一组配制即可,再加上无菌水,共需制备六种,则将全班分成六个组,我们为第4组,故配制过程如下:

(1)天平调平。

(2)准确秤取7.8g营养物(配390ml),葡萄糖、蔗糖、乳糖各0.65g。

(3)将营养物放入搪瓷缸中,加入390ml蒸馏水,玻璃棒搅拌将其溶解。

(4)pH试纸测其pH是否为7.4,若不是,用氢氧化钠溶液调到7.4。分装:

(1)取三个250ml锥形瓶,每个锥形瓶中倒入130ml的上述溶液。

(2)将上述称好的葡萄糖、蔗糖、乳糖分别倒入三个锥形瓶中,摇晃锥形瓶使其溶解。

(3)将加入糖的营养液分别装入12个试管中,每个试管用移液管放入10ml。

(4)将每两个葡萄糖、蔗糖、乳糖用牛皮纸扎成一捆,即每6个试管扎成一捆,写上班级、组别后待灭菌。

灭菌:将已经包扎好的试管放入灭菌箱中,进行灭菌待用。

以上就是我们组的制备过程,在这个过程中应该注意以下几点:

1、称量前天平要调平。

2、秤取营养物时应准确秤取。

3、溶解后注意调pH值到7.4

4、量取培养液时要准确,特别是向试管中分装时要用移液管。

2.2酵母菌的分离(详述分离方法,培养条件及观察到的菌落结果)

步骤过程:

1、倒平板:待YPD培养基冷却至50度左右后,按无菌操作法倒12只平板(每皿约倒15ml),平置,待凝。

2、酵母菌稀释:取1mL菌悬液放入装有99ml的无菌水锥形瓶中,摇匀后再从锥形瓶中取1mL放入1号管,依次进行,则管里酵母的浓度依次是10-2~10-7。

3、平板分离:依次从10-7,10-6,10-5的管里取稀释液进行涂布平板,YPD平板每个浓度涂两个。

4、划线法分离:用接种环从酵母斜面上取一环酵母,在酒精灯前按无菌操作法进行划线,将酵母接种于6个平板中。

5、恒温培养:将12个培养皿平板置于30℃恒温箱中培养24~48小时。结果:

观察菌落:出现了4种不同形态的菌落。

①圆形,菌落大,表面光滑,湿润,突起,乳白色。

②圆形,菌落略小,湿润,突起,质地均匀,呈乳白色。

③椭圆形,菌落略小,湿润,突起,颜色均一,呈乳白色。

④椭圆形,菌落大,湿润,突起,颜色均一,呈乳白色。

结果分析:

通过网上查阅资料显示,正常条件下大多数酵母菌的菌落特征与细菌相似,但比细菌菌落大而厚,菌落表面光滑、湿润、粘稠,容易挑起,菌落质地均匀,正反面和边缘、中央部位的颜色都很均一,菌落多为乳白色,少数为红色,个别为黑色。啤酒酵母的菌落红酵母的菌落各种酵母菌的菌落。

将我们观察的结果与资料相比,确实符合大多数酵母菌的菌落形态。结论:观察到的是酵母菌落。

2.3酵母菌的初步鉴定(包括革兰氏染色和糖代谢实验)

2.3.1将平板上分离到的各菌株进行简单染色后进行镜检

观察结果为:

球菌,各个细胞的形状比较规整。

结论:

通过菌体个体形态和菌落形态,初步确定出了一株酵母菌。

注意事项:

1、搬动显微镜时应一手握住镜臂,另一手托住底座,镜身保持直立,并紧靠身体,步态稳健。切记单手拎提,以免目镜头从镜筒上掉出而砸坏。

2、各个镜面切忌用手涂抹,以免手上的油、汗污染镜面,造成发霉、腐蚀。

2.3.2将初步确定的菌株进行生化实验

步骤过程:

用接种环从平板上挑取已分离的同一菌落接种于糖发酵管和硝酸盐生化管中,接种完后30℃培养。24小时后观察结果。

与此同时,将平板上的酵母单菌落接种保藏于斜面培养基(PDA),30度培养48小时后,4度冷藏,待检其他特性。

结果:

验中并没有观察到,但硝酸盐管中变黄,则分析结果,可能是酵母菌生长不旺盛,导致即使产气也看不出来。

根据这一现象,能够说明该菌株具有产酸产气性能,确定此菌株确实是酵母菌。

3、发酵产酯实验(11.23-11.24)

步骤过程:

(1)准确吸取25ml发酵液于250ml锥形瓶中,加入25ml蒸馏水,滴2滴酚酞指示剂,用0.1mol/L的氢氧化钠滴至微红色,记下消耗氢氧化钠溶液的体积。

(2)将滴定后的发酵液转移至250ml锥形瓶中,准确加入15ml上述氢氧化钠标液,接上冷凝管,加热至沸回流30min。

(3)取下冷却至室温,完全转移至250ml碘量瓶中立即用0.1mol/L的盐酸溶液滴定至微红色刚好消失,纪录盐酸溶液的用量,记录总酯的含量。结果:

氢氧化钠消耗体积:V1=1.9ml

盐酸消耗体积:V2>15ml

分析与结论:氢氧化钠消耗体积1.9ml用来预估总酯含量,且其越大则总酯越少。由此可见,产酯量应该不少。

按公式:总酯=(15-V2)X0.1X10-3mol但是我们滴到18ml仍不见结果,并且没有要到微红的迹象。可能是由于配制实验试剂时出现问题,导致没有测出总酯量。

五、总结

短短一周的微生物实习在紧张又有效率的节奏下顺利的结束了。这是我们自己在老师协助下并亲自动手连续完成的一些列实验,在其中感受到了很多平时和课上很少遇到的东西,有自主,有探索,有反思,有合作

短暂的实习转眼而过,回顾实习生活,我在实习的过程中,既有收获的喜悦,也有一些遗憾。喜悦是我们都在老师的指导下自主设计了方案并分工鲜明,合理掌握每一步实验用时及时、准确测量数据,最终都得到了相应的结果。而遗憾那就是对实验有些方面的认识仅仅停留在表面,只是在看人做,听人讲如何做,未能够亲身感受、具体处理一些工作,所以未能领会其精髓。但时通过实习,加深了我对实验和微生物基本知识的理解,丰富了我的微生物实验的知识,使我对实验有了深层次的感性和理性认识。认识到要做好实验,既要注重理论知识的学习,更重要的是要把实践与理论两者紧密相结合。更进一步体会到了“实践是最好的老师”的深刻意义。

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